細胞遷移/侵襲實驗
2015-10-2 21:48:10 點擊：
transwell侵襲實驗
transwell侵襲實驗是用一層膜將高營養的培養液和低營養的培養液隔開，細胞放在低營養的培養液里，細胞會往高營養的培養液方向移動。應用不同孔徑和經過不同處理的聚碳酸酯膜，就可以進行共培養、細胞趨化、細胞遷移、細胞侵襲等多種方面的研究。
小于3.0um孔徑條件下，細胞不會遷徙通過，因此，若研究不涉及細胞運動能力，不需要細胞穿過聚碳酸酯膜，則應選擇3.0μm以下孔徑。常用0.4、3.0μm。我們實驗室用的是0.4μm。將細胞A種于上室，細胞B種于下室，可以研究細胞B分泌或代謝產生的物質對細胞A的影響。
（2）趨化性實驗
可用5.0、8.0、12.0μm膜，上室細胞可穿過聚碳酸酯膜進入下室，計數進入下室的細胞量可反映下室成分對上室細胞的趨化能力。
①細胞B對細胞A的趨化作用：將細胞A種于上室，細胞B種于下室，可以研究細胞B分泌或代謝產生的物質對細胞A的趨化作用。
②趨化因子對細胞的趨化作用：將細胞種于上室，下室加入某種趨化因子，可研究該趨化因子對細胞的趨化作用。
（3）腫瘤細胞遷移實驗
常用8.0、12.0μm膜，上室種腫瘤細胞，下室加入FBS或某些特定的趨化因子，腫瘤細胞會向營養成分高的下室跑，計數進入下室的細胞量可反映腫瘤細胞的遷移能力。
（4）腫瘤細胞侵襲實驗常用8.0、12.0μm膜，原理與腫瘤細胞遷移實驗類似。在聚碳酸酯膜上涂上一層基質膠，模仿細胞外基質，上室種腫瘤細胞，下室加入FBS或實驗設定的藥物或者影響因子，細胞會分泌相關酶類消化模擬細胞外基質膜的基質膠，從而從上室遷移到下室，通過計數進入下室的細胞量測定細胞的侵襲能力。
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