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逆轉錄-聚合酶鏈反應

更新:2015-10-5 22:20:59      點擊:
介紹

逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)

逆轉錄-聚合酶鏈反應 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)可以:(1)分析基因的轉錄產物;(2)獲取目的基因;(3)合成cDNA探針;(4)構建RNA高效轉錄系統。

miR-23a擴增曲線


miR-23a熔解曲線


服務內容
Real-time qPCR就是在PCR擴增過程中,通過熒光信號,對PCR進程進行實時檢測。由于在PCR擴增的指數時期,模板的Ct值和該模板的起始拷貝數存在線性關系,所以成為定量的依據。由于Real-time qPCR的眾多優點,現在已經是生命科學領域的一項重要技術,并成為基因表達差異和文章發表不可或缺的部分。real-time qPCR輸出的數據不同于常規PCR電泳檢測,很多沒有做過real-time qPCR的研究者常常感到高深莫測,不知從何入手;甚至一些做過一些實驗的研究者也會對數據處理分析感到迷惑。很多時候,盡管知曉qPCR的原理和基本操作,仍然浪費時間和精力,而得不到好的結果或對大量的數據不知所措。

江陰雨汐生物的real-time qPCR技術服務,根據實驗目的,設計實驗方案(相對定量或絕對定量;SYBR Green I或Taqman探針方法),用完全按照符合國際標準(MIQE)的real-time qPCR試劑完成實驗,提供符合文章發表的客觀事實實驗報告和原始數據。

服務說明
1需提供新鮮或保存完好的細胞(至少5×10^6)、組織(至少50mg)、血液(300μl)等樣本材料;
2或純化好的總RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之間,完整性好)或總DNA(OD260/OD280在1.7-1.9之間,完整性好);
3或反轉錄好的cDNA不少于30μl(反轉錄的總RNA完整性好,純度在1.9-2.1之間);
4 同時提供待測基因序列或登錄號。

報告內容
總RNA(或DNA)濃度,電泳圖片,擴增曲線,熔解曲線,Ct值以及數據統計分析(可選)

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