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細胞遷移/侵襲實驗

更新:2015-10-5 22:36:40      點擊:
介紹

細胞遷移/侵襲實驗

Transwell侵襲實驗就是用一層膜將高營養的培養液和低營養的培養液隔開,細胞放在低營養的培養液里,細胞會往高營養的培養液方向移動。應用不同孔徑和經過不同處理的聚碳酸酯膜,就可以進行共培養、細胞趨化、細胞遷移、細胞侵襲等多種方面的研究。


(1)共培養體系:

小于3.0um孔徑條件下,細胞不會遷徙通過,因此,若研究不涉及細胞運動能力,不需要細胞穿過聚碳酸酯膜,則應選擇3.0μm以下孔徑。常用0.4、3.0μm。我們實驗室用的是0.4μm。將細胞A種于上室,細胞B種于下室,可以研究細胞B分泌或代謝產生的物質對細胞A的影響。


(2)趨化性實驗
可用5.0、8.0、12.0μm膜,上室細胞可穿過聚碳酸酯膜進入下室,計數進入下室的細胞量可反映下室成分對上室細胞的趨化能力。
①細胞B對細胞A的趨化作用:將細胞A種于上室,細胞B種于下室,可以研究細胞B分泌或代謝產生的物質對細胞A的趨化作用。

②趨化因子對細胞的趨化作用:將細胞種于上室,下室加入某種趨化因子,可研究該趨化因子對細胞的趨化作用。


(3)腫瘤細胞遷移實驗

常用8.0、12.0μm膜,上室種腫瘤細胞,下室加入FBS或某些特定的趨化因子,腫瘤細胞會向營養成分高的下室跑,計數進入下室的細胞量可反映腫瘤細胞的遷移能力。


(4)腫瘤細胞侵襲實驗常用8.0、12.0μm膜,原理與腫瘤細胞遷移實驗類似。在聚碳酸酯膜上涂上一層基質膠,模仿細胞外基質,上室種腫瘤細胞,下室加入FBS或實驗設定的藥物或者影響因子,細胞會分泌相關酶類消化模擬細胞外基質膜的基質膠,從而從上室遷移到下室,通過計數進入下室的細胞量測定細胞的侵襲能力。

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